การเรืองแสงในระบบภาพ In Vivo
just as it is . . .
Applications
Tumor Imaging
เซลล์ที่เสถียรของ GFP สามารถใช้เพื่อยืนยันการเป็นเนื้องอก สายเซลล์เสถียร GFP ที่สร้างขึ้นสามารถถ่ายภาพในหลอดทดลองโดยใช้ FOBI เซลล์ GFP ถูกฉีดเข้าไปในเนื้อเยื่อใต้ผิวหนังและภาพเรืองแสงเป็นการเพิ่มจำนวนเซลล์ ด้วยวิธีนี้เราสามารถได้รับภาพของการแพร่กระจายไปยังเนื้อเยื่ออื่น ๆ นอกเหนือจากการหาปริมาณและเปรียบเทียบขนาดของเนื้องอก
เมื่อเวลาผ่านไปความแรงของสัญญาณของการเรืองแสงจะเปลี่ยนไปและเวลาในการเปิดรับแสงของกล้องอาจแตกต่างกันไป โปรแกรมการวิเคราะห์ NEOimage สามารถหาปริมาณการเปลี่ยนแปลงนี้ได้โดยคำนึงถึงเงื่อนไขต่างๆเช่นเวลาในการสัมผัสและการได้รับ นอกจากนี้ยังสามารถเปรียบเทียบและวิเคราะห์ผลลัพธ์ของตัวอย่างที่มีภาพที่แตกต่างกันได้
Cell Tracking
เซลล์ต้นกำเนิดหรือเซลล์ภูมิคุ้มกันที่มีการทำงานที่เพิ่มขึ้นเพื่อวัตถุประสงค์ต่างๆสามารถถ่ายภาพภายในสัตว์เพื่อตรวจสอบตำแหน่งและความมีชีวิตของมัน เซลล์ต้นกำเนิดและเซลล์ภูมิคุ้มกันยากที่จะติดฉลากด้วยยีนเรืองแสง ดังนั้นเซลล์จึงสามารถย้อมสีด้วยน้ำยาเรืองแสงได้หลายวิธี
เซลล์ต้นกำเนิดและเซลล์ภูมิคุ้มกันที่ย้อมด้วยน้ำยาเรืองแสงสามารถใส่เข้าไปในสัตว์ได้โดยใช้วิธีการต่างๆเช่นการฉีดเข้าเส้นเลือดการฉีดเข้าช่องท้องและการฉีดเข้าใต้ผิวหนัง เซลล์เหล่านี้สามารถอยู่ได้โดยใช้การถ่ายภาพ FOBI เราสามารถตรวจสอบการอยู่รอดของเซลล์โดยใช้การวิเคราะห์เชิงปริมาณ
Plant
FOBI สามารถแสดงภาพใบพืชที่ติดป้าย GFP ใบพืชหาภาพได้ยากเนื่องจากคลอโรฟิลล์มีการเรืองแสงอัตโนมัติที่แข็งแกร่ง ออโตฟลูออเรสเซนต์ของคลอโรฟิลล์สามารถถอดและวิเคราะห์ด้วย GFP โดยใช้ตัวกรองเฉพาะ
นอกจากนี้ยังสามารถใช้ autofluorescence ของคลอโรฟิลล์เป็นข้อมูลได้อีกด้วย ระดับการทำงานของคลอโรฟิลล์สามารถยืนยันได้จากความเข้มของการเรืองแสงอัตโนมัติ นอกจากนี้ยังสามารถหาภาพได้จากเมล็ดพืชและแคลลัส การถ่ายภาพด้วยสารเรืองแสงสามารถทำได้กับพืชตลอดวงจรชีวิตของพวกมัน
DDS(Drug Delivery System)
ยาหรือเซลล์ที่ติดฉลากเรืองแสงสามารถกำหนดความเข้มของการเรืองแสงในหลอดทดลองได้ ข้อมูลนี้สามารถใช้เพื่อยืนยันว่าฉลากเรืองแสงนั้นดีสำหรับการถ่ายภาพใน Vivo หรือไม่ สามารถใช้เป็นเกณฑ์ในการทำนายหรือแก้ไขผลลัพธ์ของการทดลองใน Vivo กระบวนการนี้สามารถป้องกันข้อผิดพลาดจากการทดลอง ในบางกรณีการทดลองในหลอดทดลองอาจมีความสำคัญในตัวมันเอง
ยาที่ได้รับการยืนยันในหลอดทดลองสามารถฉีดเข้าไปในสัตว์เพื่อการทดลองได้ ด้วยการถ่ายภาพในบางช่วงคุณสามารถตรวจสอบการเคลื่อนไหวและรูปแบบการสะสมของยาในเนื้อเยื่อที่มีชีวิตของสัตว์ได้
ภาพของยาที่ยืนยันใน Vivo สามารถตรวจสอบได้อีกครั้ง Ex Vivo เนื่องจากการเรืองแสงยังคงแสดงแม้หลังจากที่สัตว์ถูกสังเวยไปแล้วจึงสามารถหาปริมาณเนื้อเยื่อแต่ละชิ้นแยกกันได้ ข้อมูล Ex Vivo ที่เกิดขึ้นพร้อมกับข้อมูลใน Vivo สามารถเป็นหลักฐานที่ดีเยี่ยมสำหรับการทดลอง
Fig. 1. Animal imaging by FOBI
It is possible to apply most fluorescence proteins and fluorescence materials from GFP to ICG using four channels of Blue, Green, Red and NIR. Since more than one fluorescent substance can be imaged, different functions can be observed in one sample. For example, tumor imaging and drug imaging can be performed in the same animal, so targeting and tumorization can be observed simultaneously. You can also merge bright images in order to localization the fluorescence within the animal.
Fig. 2. Fluorescence imaging of various materials and methods
a. Fluorescence labeled chemicals in the Zebrafish. b. GFP cell in the 24well plate. c. Fluorescence labeling test. d. Ex Vivo imaging for drug delivery system. e. GFP expression leaf infected gene by virus vehicle. f. Auto-fluorescence from the chlorophyll. g. Gene expression on the leaf with marker gene. h. Gene transfected seed seperated by GFP imaging.